Nano bạc điều trị hiệu quả vết thương bỏng ở thỏ
Chúng tôi đã chuẩn bị những con thỏ bị bỏng nước sôi với các mô hình bỏng độ II và áp dụng màng phủ hydrogel nano bạc liều cao, trung bình và thấp cho các thời gian và khu vực khác nhau. Sau đó, chúng tôi so sánh sự khác biệt của trọng lượng giấy bị đốt cháy trước khi sử dụng và sau khi sử dụng mô hình bỏng, vết bỏng, nhiễm trùng kích ứng da tại chỗ, lớp vỏ và vảy da theo thời gian, và tác động của hình thái mô da tại chỗ. Kết quả thu được mô hình bỏng sâu độ II thỏ thành công; ở ngày thứ 12, 18, màng phủ nano bạc hydrogel liều cao, trung bình và thấp làm giảm rõ rệt kích ứng da của thỏ mắc bệnh với giá trị tích phân (P < 0,01 , P < 0,05 ); liều cao, trung bình và thấp của nhóm màng phủ nano bạc hydrogel làm giảm đáng kể kích ứng da, giá trị tích phân nhiễm trùng ( P < 0,01, P < 0,05); liều lượng cao, trung bình và thấp của màng phủ nano bạc hydrogel giúp giảm đáng kể thời gian đóng vảy trên da của thỏ dán phim ( P < 0,01), rút ngắn đáng kể thời gian bỏng da thỏ so với thời gian đóng vảy ( P < 0,01) và cải thiện rõ rệt hiệu quả điều trị bệnh ngoài da ở thỏ thay đổi mô hình bỏng nước ( P < 0,01, P < 0,05).
1 . Giới thiệu
Bỏng và bỏng là thiệt hại phổ biến, được gây ra bởi nhiều yếu tố như vật lý, hóa học, bức xạ, v.v. Đây là một căn bệnh cực kỳ phức tạp và gây tổn thương ( Deng và cộng sự, 2011 , Muhammad và cộng sự, 2017 , Rashid và cộng sự, 2017). Quản lý vết thương bỏng là một phần quan trọng của điều trị. Ngoài điều trị phẫu thuật, hầu hết băng vết thương đều cần điều trị. Thời gian lành vết thương tại chỗ hợp lý có thể ảnh hưởng trực tiếp đến quá trình và kết quả điều trị tổng thể của vết thương bỏng độ sâu. Hạt nano bạc có tác dụng kháng khuẩn phổ rộng kéo dài, dễ sinh kháng thuốc và các đặc tính khác. Gel nano bạc trong ứng dụng lâm sàng đặc biệt phổ biến. Nó có thể được chia thành các loại khác nhau theo quy trình khác nhau. Gel nano bạc có thể điều trị viêm cổ tử cung, viêm âm đạo, trĩ, viêm mũi và các tác dụng khác ( Zhou et al., 2011 , Yang et al., 2014). Kết quả khảo sát tác dụng kháng khuẩn của màng composite nano bạc – hydrogel trên thỏ là mô hình bỏng độ để đánh giá giá trị của nano bạc trong điều trị vết thương bỏng.
2 . Vật liệu
2.1 . động vật thí nghiệm
Thỏ Nhật Bản cấp tướng do Công ty động vật thí nghiệm Kangda Hà Nam cung cấp, số chứng nhận động vật: 1005365.
2.2 . Thuốc và thuốc thử
Màng băng vết thương hydrogel nano bạc, do Công ty TNHH Viện nghiên cứu Tongweisuo của Viện Hàn lâm Khoa học tỉnh Hà Nam cung cấp, số lô 20120712-7; Thuốc mỡ trị bỏng Jingwanhong, Jingwanhong Tianjin Darentang Pharmaceutical Co. Ltd., số lô 211793; axit sunfuricgiấy, Zhejiang Minfeng Special Paper Co., Ltd., số lô 20121218; Ethyl carbamate (urethane), thu hồi của Tianjin Institute of Fine Chemicals, lô số 20120401; Kem làm rụng lông Claudel, Công ty TNHH Mỹ phẩm Yibai Ya Quảng Châu, số lô 20110321; Túi gạc thấm y tế, Công ty TNHH vật tư vệ sinh ngày Hà Nam, số lô 20120603; Thạch cao y tế HL-RA, Công ty TNHH vật liệu vệ sinh Từ Châu Hongli số lô 20121022; Thuốc tiêm Natri Clorua, Công ty TNHH Dược phẩm Chen Xin, số lô 1208308201; Dung dịch formaldehyde, Công ty TNHH Hóa chất Yantai shuangshuang, số lô 20121012.
3 . phương pháp
3.1 . Mẫu
Chúng tôi lấy những con thỏ Nhật Bản khỏe mạnh 36, 2,0–2,5 kg, đực và cái. Sau khi cạo cả hai bên lưng thỏ bằng kem tẩy lông Claudel thông minh, chúng tôi loại bỏ lông thỏ trên diện tích khoảng 20 cm × 15 cm; ngày hôm sau lấy 30 người để làm mẫu, được tiêm thuốc tê 20% urethane (1 g/kg) vào tĩnh mạch tai, và chân tay của họ ở tư thế nằm sấp. Chúng được cố định trên bàn mổ bằng dây cao su. Chúng tôi cho gói cotton pad (18 tầng) trọng lượng 200 g, đường kính 1,8 cm vào nước sôi 100 độ C để thấm . Sau khi đun sôi, chúng tôi ngay lập tức đặt chúng ở bên trái và bên phải của khu vực chuẩn bị da cột sống, mỗi áp suất 20 s, từ trước ra sau ở mỗi bên của mỗi vết thương hình tròn nóng ba, dẫn đến tổng cộng 6 vết thương cho mỗi con vật. Đường kính vết thương 1,8 cm, diện tích khoảng 2,54 cm 2 , mô hình bỏng sâu độ II (xác định sinh thiết). Ngay sau đó, chúng tôi tiêm vào màng bụng nước muối vô trùng 20 mL/chỉ ở một số mô hình đó ( Wu et al., 2011 , Miao et al., 2016 , Wang et al., 2016 , Razali và Said, 2017 ).
3.2 . Phân nhóm và quản lý
Ngày hôm sau sau khi bị bỏng bằng giấy axit sunfuric , bản vẽ đồ họa của vùng da bị bỏng, chúng tôi quan sát chất lượng của các bản vẽ, được lấy từ vùng bị bỏng trên thang đo điện tử để chỉ ra chất lượng của vết bỏng trên vùng da ( Miao et cộng sự, 2012 , Mi và cộng sự, 2014). Diện tích bỏng của động vật khác nhau do sự khác biệt trong hoạt động, vì vậy chúng tôi chia chúng thành các nhóm, cụ thể là nhóm mô hình, nhóm Jingwanhong và nhóm phim phủ nano bạc hydrogel liều lượng lớn, trung bình và nhỏ, tổng cộng là sáu nhóm. Sáu người còn lại tạo thành một nhóm kiểm soát. Sau khi làm mẫu, từng nhóm thỏ sẽ được uống các loại thuốc phù hợp. Các liều lượng lớn, trung bình và nhỏ của màng hydrogel nano bạc được bôi tại chỗ cho từng nhóm liều lượng. Nhóm Jingwanhong bôi kem trị bỏng Jingwanhong (độ dày 2 mm). Nhóm đối chứng, nhóm người mẫu, nước muối tự do trong mỗi nhóm sau khi sử dụng những thứ trên được bọc bằng màng bọc thực phẩm và dán băng keo chắc chắn, với liều lượng thường xuyên không bị gián đoạn để duy trì thuốc tiếp xúc với da trong 6 giờ mỗi ngày và dùng thuốc liên tục trong 18 ngày .
3.3 . chỉ số thực nghiệm
Các chỉ tiêu xét nghiệm: nhiễm trùng tại chỗ bỏng, toàn trạng, bệnh lý. Vùng bỏng: dùng axít sunfuric bôi lên giấy bỏng đến các vết loét đầu tiên 1, 6, 12, 18 d dọc theo vết vết thương. Chúng tôi cân đo vẽ vùng da bị bỏng. Sự thay đổi của cân nặng cho thấy sự thay đổi của làn da bỏng rát. Chúng tôi sử dụng trọng lượng của tờ giấy trước khi dùng để trừ đi sau khi điều trị để đánh giá tác dụng của thuốc thử nghiệm ( Wang và cộng sự, 2014 , Shamsudin và cộng sự, 2017 , Zaheer và cộng sự, 2017). Đốt cháy bệnh lý mô cục bộ: ngày hôm sau sau liều cuối cùng, tiến hành kiểm tra mô bệnh học đã rút ra, cắt các phần da bị bỏng, cố định chúng trong dung dịch formalin 10% và cắt thành các phần nhúng parafin. Sự nhuộm màu của nó được quan sát để so sánh vết bỏng của từng nhóm thỏ để quan sát mức độ lành của da.
3.4 . Phương pháp phân tích thống kê
Số liệu được phân tích bằng phần mềm thống kê Windows SPSS 17.0. Sự khác biệt của dữ liệu đo lường giữa các nhóm được phân tích bằng ANOVA.
4 . Kết quả
4.1 . Ảnh hưởng của màng phủ hydrogel nano bạc đến mô hình bỏng thỏ ( x ± s)
Qua bảng 1 có thể thấy , so với nhóm để trống, diện tích giấy trên da chênh lệch trọng lượng giấy ở nhóm mô hình là có ý nghĩa ( P < 0,01), điều này cho thấy mô hình thỏ đốt thành công. So với nhóm mô hình, vào ngày thứ 6, nhóm bỏng phủ nano bạc hydrogel liều cao và thấp và sự khác biệt về trọng lượng giấy trên diện tích da của thỏ Jingwanhong tăng lên đáng kể ( P < 0,05 ) ; vào ngày 12, liều trung bình của nhóm màng phủ nano bạc hydrogel và thỏ Jingwanhong đốt cháy vùng da của sự khác biệt về trọng lượng giấy đã tăng lên đáng kể ( P < 0,05); ở ngày thứ 18, liều trung bình phủ màng nano bạc hydrogel nhóm thỏ diện tích da thỏ bị đốt khác biệt trọng lượng giấy được tăng lên rõ rệt ( P < 0,05).
2 . Màng hydrogel nano bạc được đốt kích ứng da cục bộ tại các điểm nhiễm bệnh của thỏ
Như có thể thấy từ Bảng 2 , vào ngày thứ 3, nhóm màng phủ nano bạc hydrogel liều cao, trung bình và thấp và giá trị tích hợp kích ứng da nhiễm bệnh của thỏ Jingwanhong giảm đáng kể ( P < 0,05 ) ; Vào ngày thứ 6, nhóm màng phủ nano bạc hydrogel liều cao làm giảm đáng kể kích ứng da thỏ nhiễm giá trị tích phân ( P < 0,01), nhóm màng phủ nano bạc hydrogel liều cao làm giảm đáng kể kích ứng da thỏ nhiễm giá trị tích phân ( P < 0,05) ; vào ngày điều trị thứ 12 và 18, nhiễm trùng kích ứng da của mỗi nhóm thỏ đã biến mất.
Bảng 2 . Phủ nano bạc hydrogel lên các điểm nhiễm ban đỏ trên da thỏ
4.3 . Tác dụng của nano bạc hydrogel phủ lên sẹo và thời gian đóng vảy trên da thỏ
Qua bảng 3 có thể thấy , da ở nhóm trắng và bình thường, nhóm có mô hình xuất hiện vảy, thời gian đóng vảy; so với nhóm mô hình, nhóm màng phủ nano bạc hydrogel liều trung bình và thấp và nhóm Jingwanhong có thể rút ngắn đáng kể thời gian đóng vảy trên da của thỏ bị bỏng ( P < 0,01); liều lượng cao, trung bình và thấp của nhóm màng phủ nano bạc hydrogel và nhóm Jingwanhong có thể rút ngắn đáng kể thời gian đóng vảy trên da thỏ bị bỏng ( P < 0,01).
Bảng 3 . Ảnh hưởng của Nano bạc hydrogel phủ lên vết sẹo bỏng da thỏ và thời gian đóng vảy
4.4 . Ảnh hưởng của nano bạc hydrogel phủ lên hình thái mô tại chỗ trên da thỏ
Như có thể thấy từ Bảng 4 , sau thử nghiệm Ridit , so với nhóm trống, những thay đổi bệnh lý đáng kể trên da của thỏ nhóm mô hình. So với nhóm mô hình, nhóm màng phủ nano bạc hydrogel liều cao và trung bình có thể cải thiện đáng kể các biến đổi bệnh lý da trên mô hình bỏng ( P < 0,01).
Bảng 4 . Ảnh hưởng của Nano bạc hydrogel phủ lên hình thái mô tại chỗ của vết bỏng trên da thỏ.
“−”: Dày sừng, biểu mô vảy, nang lông, tuyến nang lông, tuyến bãvà các mô dưới da bình thường; “+”: lớp sừng hóa mỏng hơn, tăng sản biểu mô vảy nhẹ, nang tuyến nhỏ biến tính một phần, tăng sinh tế bào bã nhờn nhẹ, mô dưới da, bình thường; “++”: dày lớp sừng và thoát ra một lượng nhỏ tế bào viêm, tăng sản biểu mô vảy, biến tính một phần nang lông, các tuyến nang lông, tuyến bã phosphat, mô hạt dưới da bị thay thế; “+++”: lớp sừng dày lên và xuất tiết tế bào viêm, biểu mô vảy tăng sinh rõ rệt, nang lông thoái hóa, nang lông, tuyến bã biến mất, mô dưới da thay thế bằng một lượng lớn mô hạt.
Mỗi nhóm thỏ đốt lại kết quả hình thái mô cục bộ phụ lục: nhóm đối chứng động vật lớp sừng của mô biểu mô và tế bào biểu mô vảy nguyên vẹn và mô dưới da mỏng và nang lông của nang lông và tuyến bãbình thường, cả dưới da bình thường, xem ảnh 1; nhóm mô hình động vật thí nghiệm lớp sừng của biểu mô, biểu mô vảy biến tính hoàn toàn, mô dưới da, nang lông và tuyến bã và nang lông bị biến tính và biến mất. Mô dưới da được thay thế bằng một lượng lớn mô hạt, xem ảnh 2; Trong nhóm Jingwanhong, một số động vật thí nghiệm lớp mô biểu mô dày lên dày sừng, tăng sản biểu mô vảy và tế bào viêm xuất tiết đáng kể, mô dưới da của nang lông, tuyến bã nhờn và nang lông là phốt phát; lớp sừng của một số mô biểu mô động vật biến mất. Tăng sản biểu mô vảy và nang lông bị biến tính hoàn toàn. Mô dưới da, nang lông và tuyến bã nhờn biến mất. Mô dưới da được thay thế bằng một lượng lớn mô hạt, xem ảnh 3; liều lượng lớn màng phủ nano bạc hydrogel thí nghiệm trên động vật lớp biểu mô sừng hóa bị rò rỉ. Một lượng lớn tế bào viêm được thay thế bằng tăng sản biểu mô vảy phần nào. Mô dưới da nang lông, tuyến bã nhờn và tế bào biểu mô nang lông biến mất, thay vào đó là một lượng lớn mô hạt, xem ảnh 4; lớp sừng của biểu mô phủ Nano-bạc hydrogel nhóm động vật. Biểu mô vảy được thay thế bằng sự biến mất của nhiều tế bào viêm và thoái hóa mô, mô dưới da, nang lông, tuyến bã và nang lông biến mất, Mô dưới da được thay thế bằng một lượng lớn mô hạt, xem ảnh 5; Nano-bạc hydrogel nhóm liều nhỏ động vật được bao phủ bởi lớp sừng của biểu mô. Biểu mô vảy biến mất; nhiều dịch rỉ viêm và tế bào mô thoái hóa thay thế mô dưới da nang lông. Tuyến bã nhờn và nang lông biến mất. Mô dưới da được thay thế bằng một lượng lớn mô hạt, xem ảnh 6.
5. KẾT LUẬN
Vết thương bỏng là vết thương hở hơn và có thể dễ dàng bị nhiễm trùng bởi vi khuẩn sinh sản. Thuốc kháng sinh thường được sử dụng trong lâm sàng. Với sự gia tăng đa dạng của việc lạm dụng kháng sinh trong lâm sàng và các chủng kháng thuốc trên da và vết thương, việc sử dụng một liệu pháp kháng sinh đơn giản khó đạt được kết quả mong muốn. Các phương pháp xử lý vết thương bỏng tại chỗ rất đa dạng, nhưng làm thế nào để kiểm soát việc sử dụng thuốc bôi vết thương trị bỏng một cách hợp lý và hiệu quả vẫn đang được thảo luận sôi nổi ( Li et al., 2016 )). Y học hiện đại cho rằng, sau khi bị bỏng, các mô da tại chỗ sẽ hoạt động kém, dẫn đến vi tuần hoàn vết thương tại chỗ, lượng máu cung cấp không đủ, phù nề ứ trệ và hoại tử, đồng thời do chức năng hàng rào bảo vệ da bị tổn thương nên các loại dịch tiết viêm tăng lên. Điều này dễ dẫn đến nhiễm trùng do vi khuẩn. Và việc sử dụng các hạt Nano bạc và các nhóm thiol protein của vi khuẩn (-SH) liên kết, gây ra sự thoái hóa của chúng, do đó, việc khử hoạt tính của enzyme sulfhydryl có tác dụng kháng khuẩn phổ rộng, trong khi metallicoproteinase ma trận vết thương bằng bạc Nano có tác dụng ức chế. Ưu điểm này góp phần rất lớn vào việc chữa lành vết thương ( Shi et al., 2014 , Gao et al., 2017 ). Nano bạc là thuốc diệt nấm tự nhiên thế hệ mới không kháng sinh, với tính chất vật lý và hóa học ổn định và khả năng diệt khuẩn phổ rộng ( Liu et al., 2009 , Liu, 2016 ). Nano bạc có tính thấm mạnh, có thể nhanh chóng xâm nhập vào lỗ chân lông trên da, tiêu diệt nhiều loại vi khuẩn, nấm, mycoplasma, chlamydia và các vi khuẩn khác trong vòng vài phút, và khả năng kháng bạc của vi khuẩn là cực kỳ hiếm, do đó có được nhiều ứng dụng sinh học y tế .
Thí nghiệm đã chọn sự khác biệt về trọng lượng giấy của vùng da bị bỏng cục bộ làm chỉ số xuất hiện chính, bởi vì nó có thể nhìn thấy được; thay đổi mô bệnh học phản ánh sự suy giảm tổ chức các lớp của vùng da tổn thương và lành. Việc chọn mô bệnh lý cục bộ làm chỉ số khách quan có thể giúp chúng tôi ước tính tốt hơn mức độ mô hình hóa mô hình bỏng nước ( Li và cộng sự, 2013 , Liang và cộng sự, 2013 ). Các chỉ số trên tương ứng từ hai khía cạnh bệnh tật và chất lượng, đưa ra đánh giá toàn diện về tác dụng chữa bệnh của hỗn hợp Nano bạc hydrogel bôi ngoài trên mô hình bỏng thỏ.
Kết quả thực nghiệm cho thấy, nhóm phủ một lượng nhỏ gel Nano bạc có thể làm giảm diện tích bỏng của thỏ, tránh phù nề và nhiễm trùng bỏng. Thời gian đóng vảy da bỏng tại chỗ được rút ngắn đáng kể. Gel nano bạc có thể cải thiện đáng kể những thay đổi bệnh lý trên da của vùng da bị bỏng của thỏ, cho thấy rằng nó có tác dụng điều trị nhất định đối với vùng da bị bỏng. Vì vậy, thí nghiệm sử dụng màng gel Nano bạc để điều trị bỏng nước và bỏng lâm sàng chứng tỏ đây là một phương pháp điều trị đơn giản, hiệu quả và có thể kiểm soát được.
Nguồn tham khảo:
Effect of nano-silver hydrogel coating film on deep partial thickness scald model of rabbit