Nano bạc được tiêm dưới da của thỏ để theo dõi cholesterol toàn phần và triglyceride và khả năng chống oxy hóa
Ảnh hưởng của việc tiêm dưới da hạt nano bạc (AgNP) đến năng suất của thỏ, các thông số huyết học và sinh hóa của máu, tình trạng chống oxy hóa và dư lượng bạc trong thịt và máu ở hai giống thỏ (New Zealand White (NZW) và Jabali) sinh trưởng ở nhiệt độ môi trường cao đã được đánh giá. Tổng cộng 90 con thỏ sáu tuần tuổi (45 con NZW và 45 con Jabali) được phân bổ ngẫu nhiên thành ba nhóm điều trị bằng nhau (nhóm đối chứng, 0,5 mg và 1,0 mg AgNP/kg trọng lượng cơ thể). Những con thỏ được điều trị được tiêm hai lần một tuần trong bốn tuần liên tiếp. Kết quả cho thấy việc sử dụng AgNP không có tác dụng đáng kể đến mức tăng trọng trung bình hàng ngày (ADG), lượng thức ăn tiêu thụ và tỷ lệ chuyển đổi thức ăn (FCR). Giống NZW vượt trội hơn giống Jabali về các đặc điểm năng suất tăng trưởng, trọng lượng thân thịt, tỷ lệ thịt xẻ và các vết cắt ở phần giữa và phần sau. Việc sử dụng AgNP có tác dụng đáng kể đến các giá trị hematocrit (HCT) và tiểu cầu (PLT). Thỏ được tiêm AgNP với liều 0,5 mg cho thấy nồng độ cholesterol toàn phần và triglyceride trong huyết tương thấp hơn so với thỏ đối chứng. Giống thỏ New Zealand có chỉ số tiểu cầu, cholesterol toàn phần và triglyceride thấp đáng kể. Thỏ được tiêm 0,5 mg/kg thể trọng có khả năng chống oxy hóa toàn phần thấp nhất và chỉ số malondialdehyde (MDA) và glutathione peroxidase cao nhất. Dư lượng Ag trong máu cao hơn trong thịt ở thỏ được tiêm. Giống thỏ địa phương (Jabali) có dư lượng thấp hơn đáng kể so với giống nhập khẩu (NZW) cả trong thịt và trong máu. Tuy nhiên, lượng bạc tích lũy trong huyết tương và thịt tăng lên khi liều tăng.
- Giới thiệu
Khái niệm công nghệ nano dựa trên việc giảm kích thước hạt để thay đổi bản chất vật lý và hóa học của một nguyên tố. Công nghệ hạt nano được sử dụng rộng rãi trong nhiều ứng dụng dinh dưỡng, trị liệu và y học. Ngày nay, hạt nano được xem xét rất nhiều trong sản xuất gia súc và gia cầm do các đặc tính hóa học và vật lý. Hạt nano bạc (AgNP) được định nghĩa là các hạt có kích thước nhỏ hơn 100 nanomet. Một số nghiên cứu đã chỉ ra rằng việc cho ăn hạt nano cải thiện hiệu quả tiêu hóa, khả năng miễn dịch và năng suất ở gia súc và gia cầm. Việc sử dụng hạt nano bạc như một chất khử trùng mạnh do đặc tính kháng khuẩn và kháng nấm của nó đã dẫn đến ứng dụng gần đây trong lĩnh vực chăn nuôi [ 1 , 2 , 3 ]. Abd Al-Rahman và cộng sự [ 4 ] đã báo cáo rằng tiêm AgNP vào màng bụng có khả năng tăng cường đáp ứng miễn dịch ở chuột in vivo và in vitro. Thỏ được tiêm tĩnh mạch AgNP (0,6 mg/kg thể trọng) cho thấy các gốc oxy phản ứng trong tinh dịch cao hơn, tinh trùng di động kém hơn và vận tốc cong và mức tiêu thụ oxy thấp hơn so với động vật đối chứng. Ngược lại, ham muốn tình dục, testosterone huyết thanh, nồng độ tinh trùng và thể tích tinh dịch hầu như không bị ảnh hưởng bởi AgNP [ 5 ]. Mặt khác, nhiều báo cáo cho thấy rằng việc sử dụng AgNP trong nước uống không ảnh hưởng đến cấu hình vi khuẩn đường ruột của gà thịt [ 6 , 7 ]. Sự suy giảm về hiệu suất tăng trưởng và các đặc điểm kinh tế đã được nhận thấy ở gà thịt được xử lý bằng AgNP thông qua nước uống (lên đến 12 ppm). Việc sử dụng AgNP thông qua nước uống ở nồng độ 50 ppm làm giảm sự phát triển của gà thịt, suy giảm chức năng miễn dịch và không có tác dụng kháng khuẩn đối với các nhóm vi khuẩn đường ruột khác nhau [ 7 ]. Hơn nữa, các nghiên cứu in vivo với phôi gà và chim cút cho thấy rằng việc bổ sung AgNP thông qua nước uống không ảnh hưởng đến sự phát triển và tăng trưởng của phôi [ 8 ]. NP bạc ảnh hưởng đến việc sử dụng N và nồng độ IgG trong huyết tương; tuy nhiên, nó không ảnh hưởng đến quần thể vi khuẩn trong đường tiêu hóa, quá trình chuyển hóa năng lượng và hiệu suất tăng trưởng của gà [ 6 ].
Việc đưa những vật liệu mới này vào môi trường làm việc và các sản phẩm tiêu dùng đòi hỏi phải đánh giá an toàn cũng như hiểu rõ hơn về bất kỳ tác động tiềm ẩn nào đối với sức khỏe con người [ 9 ]. Sự gia tăng tuyến tính của việc giữ lại AgNP trong thịt, gan và phân với mức độ cao hơn đã được phát hiện ở gà thịt trống được xử lý bằng nano bạc lên đến 12 ppm thông qua nước uống [ 10 ]. Về độc tính của AgNP, Orlowski và cộng sự [ 11 ] đã báo cáo rằng các hạt nano bạc có tác dụng độc hại và có khả năng gây ra phản ứng viêm trong dòng tế bào đơn nhân của chuột. Tương tự như vậy, Sardari và cộng sự [ 12 ] cho rằng việc cho ăn AgNP gây ra độc tính trong các cơ quan của chuột. Ở chuột, Abd AL-Rhman và cộng sự [ 4 ] đã chọn liều 2 mg/kg trọng lượng cơ thể, trong khi ở thỏ, Castellini và cộng sự [ 5 ] đã chọn liều tiêm 0,6 mg/kg BW. Tuy nhiên, có rất ít nghiên cứu về việc sử dụng AgNP đối với sản xuất thỏ và dư lượng của nó trong thịt đã được tiến hành. Trong bối cảnh này, nghiên cứu hiện tại được thực hiện để trả lời các câu hỏi sau. Thứ nhất, việc tiêm AgNP có thể ảnh hưởng đến năng suất sinh trưởng của thỏ không? Thứ hai, lượng Ag tích lũy trong huyết tương và thịt của động vật được tiêm AgNP sẽ ở mức độ nào?
- Vật liệu và phương pháp
Thí nghiệm này được thực hiện tại trại thỏ thực nghiệm, Khoa Nông nghiệp và Thú y, Đại học Qassim, vào vụ xuân năm 2018. Thí nghiệm bắt đầu từ 6 tuần tuổi và kéo dài 4 tuần. Biến động nhiệt độ môi trường hàng ngày (cao và thấp) trong suốt thời gian thí nghiệm lần lượt là 33 °C ± 0,6 và 18 °C ± 0,3 (trung bình ± SE). Các quy trình chăm sóc, xử lý và lấy mẫu động vật đã được Ủy ban Đạo đức Nghiên cứu Sức khỏe và Chăm sóc Động vật thuộc Khoa Nghiên cứu Khoa học (Nghị định thư số 190208), Đại học Qassim, Ả Rập Xê Út phê duyệt.
2.1. Chăn nuôi, chế độ ăn và thiết kế thí nghiệm
Tổng cộng 90 con thỏ đang lớn, 6 tuần tuổi, đại diện cho hai giống (Jabali, giống thỏ địa phương Saudi và thỏ trắng New Zealand) đã được sử dụng trong nghiên cứu này (mỗi giống 45 con). Thỏ được phân ngẫu nhiên vào một thiết kế hoàn toàn ngẫu nhiên với sự sắp xếp giai thừa 2 × 3 của hai giống và ba liều hạt nano bạc (6 nhóm nhỏ/mỗi nhóm 15 con). Các nhóm được điều trị được tiêm dưới da 0, 0,5 và 1 mg keo nano bạc/kg trọng lượng cơ thể hai lần một tuần trong 4 tuần liên tiếp. Tất cả các con thỏ được nuôi riêng lẻ trong điều kiện chuồng trại và quản lý tương tự bên trong một chuồng thỏ bán kín trong lồng lưới kim loại (50 cm × 40 cm × 40 cm). Mỗi đơn vị lồng được trang bị một phễu cho ăn và núm uống cung cấp khả năng tiếp cận thức ăn và nước uống miễn phí. Thỏ được cho ăn chế độ ăn thương mại có chứa 18,5% protein thô, 8,0% chất xơ thô, 3,0% chất béo thô và 2250 ME Kcal/kg.
2.2. Tổng hợp keo nano bạc
Dung dịch keo của các hạt nano bạc được chuẩn bị theo Lee và Meisel [ 13 ]. Thêm từng giọt mười mililit dung dịch natri tricitrat 1% vào 500 mL dung dịch bạc nitrat (2 mM). Đun sôi hỗn hợp trong khi khuấy mạnh cho đến khi dung dịch chuyển sang màu vàng. Để hỗn hợp nguội trong khi khuấy. Một huyền phù màu xám của các hạt nano bạc được hình thành. Các hạt tổng hợp được phân tích kích thước hạt bằng máy phân tích kích thước hạt laser (S3500 Bluwave Mictotrac, Brentwood, TN, Hoa Kỳ). Kích thước trung bình của các hạt là 43 nm.
2.3. Hiệu suất tăng trưởng và đặc điểm thân thịt
Tất cả thỏ đều được cân vào lúc bắt đầu và kết thúc thí nghiệm (10 tuần tuổi). Lượng thức ăn tiêu thụ được ghi lại riêng lẻ trong suốt thời gian thí nghiệm. Tỷ lệ chuyển đổi thức ăn (FCR) được tính bằng lượng thức ăn tiêu thụ chia cho mức tăng trọng trong suốt thời gian thí nghiệm. Vào cuối thí nghiệm, sáu mươi con được cân, nhịn ăn trong 12 giờ, được tiếp cận tự do với nước uống sạch và giết mổ ( n = 10 con/mỗi nhóm phụ). Sau khi chảy máu, thỏ được mổ xẻ theo Fathi et al. [ 14 ]. Sau khi lột da, xác được mở ra và loại bỏ tất cả các cơ quan và nội tạng. Xác nóng, da, gan, tim, thận và lá lách được cắt bỏ và cân. Xác được chia thành ba phần: phần trước, phần giữa và phần sau. Tất cả dữ liệu được thể hiện dưới dạng phần trăm trọng lượng cơ thể sống.
2.4. Lấy máu, Huyết học và Xét nghiệm sinh hóa
Hai mẫu máu được lấy từ xác thỏ vào các ống nghiệm có tẩm heparin để xác định các thông số huyết học và phân tích sinh hóa. Các thông số huyết học được đánh giá bằng Máy phân tích huyết học tự động hoàn toàn kỹ thuật số, BC-3000 Plus (Mindary, Bio-Medical Electronics Co., Ltd, Mahwah, NJ, Hoa Kỳ). Các thông số này bao gồm: tổng số lượng hồng cầu (RBC), huyết sắc tố (HGB), hematocrit (HCT) và tiểu cầu (PLT). Các mẫu máu khác được ly tâm (1500 lần g trong 12 phút ở 4 °C) và huyết tương thu được được bảo quản ở -20 °C để phân tích thêm. Nồng độ protein toàn phần, albumin, cholesterol và triglyceride trong huyết tương được xác định bằng bộ kit thương mại (Biomerieux, Craponne, Pháp).
2.5. Xác định tình trạng chống oxy hóa
Tổng khả năng chống oxy hóa (TAC) được xác định bằng mmol/L bằng bộ dụng cụ thương mại (Biodiagnostic © dành cho thuốc thử chẩn đoán và nghiên cứu, Dokki, Giza, Ai Cập). Phương pháp này khai thác khả năng khử hydrogen peroxide (H 2 O 2 ) của chất chống oxy hóa. Việc xác định được thực hiện bằng phản ứng của chất chống oxy hóa trong mẫu với một lượng H 2 O 2 xác định được cung cấp từ bên ngoài . Chất chống oxy hóa trong mẫu loại bỏ một lượng H 2 O 2 nhất định được cung cấp . Lượng H 2 O 2 còn lại được định lượng bằng phương pháp đo màu bằng phản ứng enzym tạo ra sự chuyển đổi 3,5,dichloro-2-hydroxy benzensulphonate thành sản phẩm có màu. Glutathione peroxidase (GSH-Px) được xác định trong hồng cầu. Các tế bào hồng cầu được thu thập từ các mẫu máu và rửa bằng dung dịch muối 3 lần. Nước khử ion lạnh (4 °C) được thêm vào để ly giải tế bào. Phần dịch trong thu được được sử dụng trong xét nghiệm GSH-Px. Hoạt tính enzyme (khử peroxide hữu cơ) được theo dõi bằng phương pháp quang phổ bằng cách giảm độ hấp thụ ở bước sóng 340 nm. Nồng độ malondialdehyde (MDA) được xác định từ chuẩn tương đương MDA. Trước tiên, mẫu và chuẩn được phản ứng với axit thiobarbituric (TBA) trong môi trường axit ở nhiệt độ cao (95 °C) trong 30 phút để tạo thành sản phẩm màu hồng phản ứng. Mẫu và chuẩn được đo quang phổ ở bước sóng 534 nm.
2.6. Xác định dư lượng bạc trong huyết tương và thịt
Các mẫu gồm 1,5 g mẫu thịt khô (chân trái) và 1 mL huyết tương được đặt trong ống tiêu hóa chứa 5 mL dung dịch HNO 3 và 2 mL dung dịch H 2 SO 4 và để tiêu hóa trong thiết bị tiêu hóa khối nóng ở 60 ° C trong 30 phút. Sau đó, các ống được lấy ra và để nguội. Mười mililit HNO 3 đậm đặc được thêm vào và đưa trở lại đường tiêu hóa và từ từ làm nóng đến 120 ° C. H 2 O 2 được từ từ thêm vào mỗi ống cho đến khi chất lỏng của dung dịch trở nên trong suốt. Các mẫu được làm nóng cho đến khi gần khô và để nguội. Phần còn lại trong ống tiêu hóa được hòa tan trong nước khử ion cực mạnh đến 100 mL. Lượng bạc (Ag) trong dung dịch pha loãng của thịt hoặc huyết tương được xác định bằng ICP-OES (Model iCAP 7400 Duo, Thượng Hải, Trung Quốc). Các số liệu được điều chỉnh theo hệ số pha loãng.
2.7. Phân tích thống kê
Dữ liệu được đưa vào phân tích phương sai hai chiều bằng JMP Ver. 11, Cary, NC, Hoa Kỳ [ 15 ] với liều lượng tiêm hạt nano bạc và giống như các hiệu ứng cố định theo mô hình sau:
Y ijk = µ + D i + B j + (DB) ij + e ijk
Ở đâu:
- Y ijk = quan sát được thực hiện trên cá thể thứ k;
- µ = trung bình chung;
- D i = hiệu ứng cố định của liều tiêm hạt nano bạc thứ i;
- B j = hiệu ứng cố định của giống thứ j;
- (DB) ij = tương tác giữa liều lượng tiêm hạt nano bạc và giống;
- e ijk = lỗi ngẫu nhiên được coi là phân phối chuẩn độc lập với trung bình = 0 và phương sai = σ 2 .
Tất cả kết quả được trình bày dưới dạng giá trị trung bình và độ biến thiên của dữ liệu được thể hiện dưới dạng sai số chuẩn gộp của giá trị trung bình (SEM). Mức độ khác biệt có ý nghĩa giữa các nhóm được đánh giá bằng kiểm định Tukey. Mức độ có ý nghĩa thống kê được xem xét khi p < 0,05.
- Kết quả
3.1. Hiệu suất tăng trưởng
Tác động của việc sử dụng AgNPs lên trọng lượng cơ thể (BW), tăng trọng trung bình hàng ngày (ADG), lượng thức ăn tiêu thụ (FI) và tỷ lệ chuyển đổi thức ăn (FCR) được liệt kê trong Bảng 1. Việc sử dụng AgNPs có tác động đáng kể đến BW cuối cùng ( p < 0,02). Thỏ được tiêm liều thấp AgNPs (0,5 mg/kg BW) có BW cuối cùng nặng hơn đáng kể so với động vật đối chứng, cho thấy những con được tiêm liều cao (1 mg/kg BW) có giá trị trung gian. Việc sử dụng AgNPs không có tác động đáng kể đến ADG, FI và FCR. Về tác động đến giống, giống nhập khẩu (New Zealand White) vượt trội hơn giống địa phương (giống Jabali) về BW cuối cùng ( p < 0,01), ADG ( p < 0,01), FCR ( p < 0,01) và FI ( p < 0,29). Sự tương tác giữa việc sử dụng AgNPs và giống không có tác động đáng kể đến các thông số hiệu suất tăng trưởng trong điều kiện nhiệt độ môi trường cao ( Bảng 1 ).
Bảng 1. Tác động của liều lượng tiêm hạt nano bạc (AgNP) và giống đến trọng lượng cơ thể, ADG, FI và FCR ở hai giống thỏ.
3.2. Đặc điểm thân thịt và các cơ quan có trọng lượng tương đối
Tác động chính của việc quản lý AgNP và giống đối với các phép đo thân thịt và các cơ quan nội tạng được trình bày trong Bảng 2. Không có sự khác biệt đáng kể nào được phát hiện đối với tỷ lệ làm sạch và các phần khác nhau của thân thịt do thực tế là việc quản lý AgNP hoặc giống. Một sự khác biệt đáng kể đã được tìm thấy do tác động của giống đối với trọng lượng thân thịt ( p < 0,04). Giống thỏ NZW có trọng lượng thân thịt nặng nhất so với thỏ Jabali. Không có sự khác biệt đáng kể nào đối với các phần thân thịt còn lại do tác động của giống. Có thể nhận thấy rằng liều AgNP được tiêm có tác động không đáng kể đến tỷ lệ gan, tim, thận và lách ( p > 0,05). Liên quan đến giống, thỏ Jabali có tỷ lệ lách tương đối cao hơn đáng kể ( p < 0,03) so với thỏ NZW. Một tương tác đáng kể giữa việc quản lý và giống đã được phát hiện trong tỷ lệ làm sạch thân thịt và phần giữa thân thịt, mô tả hành vi khác nhau đối với từng giống. Điều đáng chú ý là giống NZW có liên quan đến phần giữa cao hơn ở những con vật được điều trị bằng AgNP, trong khi xu hướng ngược lại được tìm thấy ở giống Jabali.
Bảng 2. Tác động của liều lượng tiêm AgNP và giống lên đặc điểm thân thịt và các cơ quan nội tạng tính theo tỷ lệ phần trăm trọng lượng cơ thể.
3.3. Thành phần sinh hóa huyết học và huyết tương của máu
Ảnh hưởng của việc quản lý AgNP và giống lên một số thông số huyết học và thành phần huyết tương được trình bày trong Bảng 3. Việc quản lý AgNP không có tác dụng đáng kể lên tất cả các thông số máu ngoại trừ giá trị HCT và PLT. Thỏ được tiêm liều cao AgNP (1 mg/kg BW) có giá trị HCT cao nhất đáng kể ( p = 0,04) so với động vật đối chứng, cho thấy những con được tiêm liều thấp (0,5 mg/kg BW) có giá trị trung gian. Giá trị tiểu cầu giảm đáng kể ( p = 0,02) do việc quản lý AgNP khi so sánh với thỏ đối chứng. Như thể hiện trong Bảng 3 , nồng độ protein toàn phần, albumin, globulin, cholesterol toàn phần và triglyceride trong huyết tương không bị ảnh hưởng đáng kể do việc quản lý AgNP. Tuy nhiên, trên cơ sở yếu tố giống, có sự khác biệt đáng kể giữa các giống về nồng độ albumin, cholesterol toàn phần và triglyceride, trong khi không phát hiện thấy sự khác biệt đáng kể nào đối với protein toàn phần và globulin. Giống NZW có chỉ số tiểu cầu, cholesterol toàn phần và triglyceride thấp hơn đáng kể ( p < 0,05) so với giống Jabali. Tuy nhiên, giống Jabali ghi nhận mức albumin huyết tương thấp hơn đáng kể ( p < 0,05) so với giống nhập khẩu. Tương tác giữa việc sử dụng AgNP và giống không có tác động đáng kể đến tất cả các thông số máu trong điều kiện nhiệt độ môi trường cao.
Bảng 3. Ảnh hưởng của liều lượng tiêm AgNP và giống đến các thông số huyết học và sinh hóa máu ở thỏ.
3.4. Tính chất chống oxy hóa và quá trình peroxy hóa lipid
Dữ liệu liên quan đến ảnh hưởng của việc sử dụng AgNP, giống và tương tác của chúng lên đặc tính chống oxy hóa của huyết tương được trình bày trong Bảng 4. Có thể thấy rằng không có sự khác biệt đáng kể nào về TAC, GSH-Px và MDA do việc sử dụng AgNP, giống và tương tác của chúng ở thỏ đang phát triển trong điều kiện nhiệt độ môi trường cao.
Bảng 4. Ảnh hưởng của liều lượng tiêm AgNP và giống đến đặc điểm chống oxy hóa ở thỏ.
3.5. Dư lượng bạc trong huyết tương và thịt
Tác động của việc quản lý nano bạc, giống và tương tác của chúng đối với lượng dư lượng bạc trong thịt và huyết tương được trình bày trong Bảng 5. Liều lượng AgNP có tác động rất đáng kể đến dư lượng Ag trong thịt ( p < 0,01). Trong khi trong huyết tương, sự gia tăng ( p < 0,08) trong dư lượng đã được quan sát thấy ở thỏ được tiêm với liều lượng cao so với những con được tiêm với liều lượng thấp. Rõ ràng là dư lượng trong cả thịt và huyết tương đều tăng khi liều lượng AgNP được tiêm tăng. Trên cơ sở tác động của giống, có một tác động rất đáng kể ( p < 0,01) đối với dư lượng Ag trong thịt và huyết tương. Lượng Ag tích lũy cao hơn ở giống NZW so với giống Jabali. Ngoài ra, một tương tác đáng kể giữa liều lượng quản lý AgNP và giống đã được phát hiện đối với dư lượng Ag trong thịt ( Bảng 5 ). Cách thức hành vi của dư lượng Ag trong thịt Jabali do tiêm AgNP không giống với giống NZW.
Bảng 5. Ảnh hưởng của liều lượng tiêm AgNP và giống đến lượng bạc còn lại trong thịt và huyết tương ở thỏ.
- Thảo luận
4.1. Hiệu suất tăng trưởng
Như thể hiện trong Bảng 1 , việc sử dụng nano bạc có tác động đáng kể đến BW cuối cùng ở nhiệt độ môi trường cao ( p < 0,02). Những kết quả này phù hợp với Hang và Tra [ 16 ], những người phát hiện ra rằng BW của thỏ được cho uống AgNP trong nước cao hơn nhóm đối chứng. Họ nói thêm rằng không có sự khác biệt về FI giữa cả hai nhóm. Ở gà thịt, Andi et al. [ 17 ] và Hassan [ 18 ] phát hiện ra rằng gà thịt được xử lý bằng AgNP có BW nặng hơn và BWG cao hơn so với nhóm đối chứng. Các tác giả cho rằng sự gia tăng này là do tác dụng sinh học của AgNP đối với vi khuẩn có hại trong ruột, dẫn đến cải thiện sự phát triển khi khả năng hấp thụ chất dinh dưỡng tăng lên [ 19 ]. Ngoài ra, tác dụng kích thích tăng trưởng của nano bạc có thể là do kích thích hoạt động của enzym tiêu hóa, dẫn đến cải thiện khả năng hấp thụ chất dinh dưỡng [ 20 ]. Ngược lại, một số nghiên cứu trước đây không tìm thấy sự cải thiện về hiệu suất tăng trưởng ở gà thịt được cho ăn chế độ ăn bổ sung AgNP [ 10 , 21 , 22 ]. Những phát hiện tương tự đã được phát hiện trong nghiên cứu hiện tại. Việc sử dụng AgNP không có tác động đáng kể đến BWG, FI và FCR ( Bảng 1 ). Những phát hiện mâu thuẫn này có thể là do sự khác biệt về kích thước, liều lượng, thời gian tiếp xúc và phương pháp chế biến AgNP.
4.2. Đặc điểm thân thịt
Có thể nhận thấy rằng liều lượng nano bạc không có tác dụng đáng kể đến trọng lượng thân thịt, tỷ lệ làm sạch và các bộ phận khác nhau của thân thịt, chẳng hạn như tỷ lệ gan, tim, thận và lách ( p > 0,05). Tương tự như vậy, ở chuột, Kim et al. [ 23 ] đã báo cáo rằng việc uống nano bạc có tác dụng không đáng kể đến trọng lượng tương đối của lách, gan, tim và thận. Mặt khác, Abd [ 24 ] phát hiện thấy tỷ lệ lách của thỏ được tiêm AgNP tăng lên so với thỏ đối chứng. Ở gà thịt, Hassan [ 18 ] phát hiện ra rằng việc bổ sung AgNP vào nước uống hoặc chế độ ăn có tác dụng đáng kể đến tỷ lệ làm sạch, gan và tim. Kết quả của nghiên cứu hiện tại chỉ ra rằng giống có tác dụng đáng kể đến tỷ lệ lách. Giống Jabali có tỷ lệ lách tương đối cao hơn và điều này có thể là do sự khác biệt về kiểu gen ( Bảng 2 ). Pla et al. [ 25 ] báo cáo rằng giống thỏ có tác động rất đáng kể đến tỷ lệ thịt xẻ, trọng lượng gan và trọng lượng phần sau. Wang và cộng sự [ 26 ] phát hiện ra rằng giống thỏ có tác động đáng kể đến tỷ lệ đầu, da, gan và thận. Metzger và cộng sự [ 27 ] chỉ ra rằng gan, tim và thận là các cơ quan trưởng thành sớm và thỏ có mức tăng trọng cao có sự phát triển sớm hơn. Mặt khác, Ghosh và Mandal [ 28 ] phát hiện ra rằng không có sự khác biệt đáng kể về trọng lượng các cơ quan giữa các giống được nghiên cứu.
4.3. Thành phần sinh hóa huyết học và huyết tương của máu
Quản lý AgNP không có tác dụng đáng kể trong tất cả các thông số máu ngoại trừ các giá trị HCT và PLT ( Bảng 3 ). Tương tự như vậy, Syrvatka et al. [ 29 ] báo cáo rằng tất cả các thông số máu được nghiên cứu đều không bị ảnh hưởng đáng kể bởi các phương pháp điều trị AgNP ở thỏ cái NZW. Raheem [ 30 ] phát hiện ra rằng có sự gia tăng các giá trị RBC, PLT và HCT ở thỏ được tiêm chủng bằng AgNP so với thỏ đối chứng. Sarhan và Hussein [ 31 ] phát hiện ra rằng AgNP tiêm tĩnh mạch dẫn đến những thay đổi trong các giá trị của PLT và RBC, và họ cho rằng sự thay đổi trong RBC là do phản ứng sinh miễn dịch tăng lên hoặc rối loạn trong các con đường truyền tín hiệu và quá trình trưởng thành của tế bào. Atmaca et al. [ 32 ] báo cáo rằng sự giảm số lượng PLT là do tác động có hại lên các cơ quan tạo máu. Dữ liệu của nghiên cứu hiện tại minh họa rằng việc quản lý AgNP ở liều cao làm tăng đáng kể các giá trị HCT ( p = 0,04) so với động vật đối chứng. Tác dụng không đáng kể lên HGB và RBC do liều tiêm được tìm thấy, cho thấy phương pháp điều trị này không có tác dụng có hại đối với thỏ đang lớn trong điều kiện nhiệt độ môi trường cao. Nồng độ protein toàn phần, albumin, globulin, cholesterol toàn phần và triglyceride trong huyết tương không bị ảnh hưởng đáng kể do việc sử dụng AgNP. Ngược lại, Saleh và El-Magd [ 20 ] báo cáo rằng triglyceride và cholesterol toàn phần trong huyết tương thấp hơn đáng kể ở gà con thịt được cho ăn chế độ ăn bổ sung AgNP, trong khi protein toàn phần trong huyết tương không bị ảnh hưởng so với nhóm đối chứng. Ahmadi [ 33 ] minh họa rằng gà con thịt được cho ăn AgNP biểu hiện những thay đổi đáng kể về protein toàn phần, albumin và gamma globulin. Về tác động của giống, có sự khác biệt đáng kể về nồng độ albumin, cholesterol toàn phần và triglyceride. Không phát hiện thấy sự khác biệt đáng kể nào về protein toàn phần và globulin. Giống NZW có giá trị tiểu cầu, cholesterol toàn phần và triglyceride thấp hơn đáng kể ( p < 0,05) so với giống Jabali. Tuy nhiên, giống Jabali ghi nhận mức albumin huyết tương thấp hơn đáng kể ( p < 0,05) so với giống nhập khẩu. Trái ngược với kết quả hiện tại, Fathi et al. [ 14 ] báo cáo rằng giống địa phương (Jabali) có số liệu HGB, RBC và HCT cao hơn giống nhập khẩu (dòng V Tây Ban Nha). El-Sheikh et al. [ 34 ] báo cáo rằng giống bản địa (Black Baladi và Gabali) có giá trị thông số máu cao hơn giống nhập khẩu (NZW và V-Line).
4.4. Tính chất chống oxy hóa và quá trình peroxy hóa lipid
Dữ liệu trong Bảng 4 chứng minh rằng việc quản lý nano bạc, giống và tương tác không có tác động đáng kể đến tổng khả năng chống oxy hóa, hoạt động GSH-Px và nồng độ MDA ở thỏ phát triển trong điều kiện nhiệt độ môi trường cao. Những kết quả này chỉ ra rằng việc quản lý 0,5 hoặc 1,0 mg AgNP/kg BW không gây ra stress oxy hóa ở thỏ trong điều kiện căng thẳng nhiệt. Tuy nhiên, việc quản lý liều cao hơn của AgNP (5 mg/kg/ngày) gây ra tổn thương gan và stress oxy hóa được minh họa bằng sự giảm đáng kể mức tổng khả năng chống oxy hóa và hoạt động của GSH-Px và superoxide dismutase ở chuột [ 35 ]. Mức GSH-Px giảm do tiêm AgNP có thể là do ái lực cao của các hạt nano đối với các nhóm thiol dẫn đến giảm hàm lượng glutathione do quá trình dọn gốc tự do [ 36 ]. Họ cho rằng sự giảm hoạt động GSH-Px này là do việc sử dụng GSH-Px ngày càng tăng để giảm thiểu tác động của các gốc tự do sau khi tiếp xúc với AgNP. Trong Bảng 4 , việc sử dụng 0,5 hoặc 1,0 mg AgNP/kg thể trọng không có tác dụng đáng kể đến nồng độ MDA ở thỏ. Ngược lại, Ognik và cộng sự [ 3 ] nhận thấy rằng có sự gia tăng hàm lượng MDA trong huyết tương và giảm nồng độ GSH-Px do việc xử lý AgNP ở gà. Họ báo cáo rằng việc xử lý AgNP gây ra stress oxy hóa dẫn đến giảm hoạt động của các enzyme chống oxy hóa trong huyết tương và gây tổn thương tế bào gan. Có thể chứng minh rằng liều thấp AgNP có thể không gây ra tác dụng bất lợi nào đối với đặc tính chống oxy hóa ở thỏ đang lớn trong điều kiện nhiệt độ môi trường cao.
4.5. Dư lượng bạc trong huyết tương và thịt
Kết quả của nghiên cứu hiện tại cho thấy liều lượng AgNP tiêm có tác động rất đáng kể đến dư lượng nano bạc trong thịt ( p < 0,01) theo cách phụ thuộc vào liều lượng ( Bảng 5 ). Một xu hướng tương tự đã được tìm thấy trong dư lượng huyết tương nhưng theo cách không đáng kể do SEM cao. Những kết quả này phù hợp với một số nghiên cứu trước đây [ 10 , 20 ], trong đó nêu rằng việc bổ sung AgNP trong chế độ ăn uống làm tăng nồng độ Ag trong cơ của gà thịt. Như thể hiện trong Bảng 5 , dư lượng cao nhất được quan sát thấy trong máu chứ không phải trong thịt, điều này có thể là do thực tế là AgNP có thể đi vào tuần hoàn máu và sau đó phân phối đến các cơ quan và cơ. Kim et al. [ 23 ] và Raheem [ 30 ] đã báo cáo rằng máu là trung tâm phân phối đến các cơ quan. Fondevila [ 37 ] phát hiện ra rằng lượng Ag lưu giữ trong gan cao hơn trong mô cơ ở gà thịt. Borel và Sabliov [ 38 ] đã báo cáo rằng các vật liệu nano có kích thước 10–100 nm tồn tại lâu hơn trong quá trình lưu thông máu trước khi được chuyển đến các cơ quan và các hạt nano có thể giữ lại và tích tụ trong cơ thể thay vì chất bài tiết. Sự phân bố của các hạt nano có thể dẫn đến tăng tương tác với protein, dẫn đến những thay đổi sinh học và sinh lý của tế bào [ 39 ]. Hơn nữa, Kulak và cộng sự [ 40 ] đã báo cáo rằng dư lượng AgNP tăng lên trong ruột khi kích thước hạt của chúng tăng lên (25 hoặc 40 nm) ở gà. Họ kết luận rằng kích thước lớn của các hạt nano có khả năng thâm nhập vào máu thấp. Wang và cộng sự [ 41 ] cho rằng gan được coi là cơ quan phân phối chính tiếp theo là lá lách. Nabinejad [ 2 ] nêu rằng các cơ và nội tạng của gia cầm có thể chuyển nano bạc cho người tiêu dùng, điều này có thể gây ra tác dụng phụ. Về mặt tương tác giữa liều lượng và giống, có thể kết luận rằng giống Jabali có khả năng thanh thải tốt hơn và tích tụ các hạt Ag trong thịt thấp hơn so với động vật NZW. Tuy nhiên, những tác động của nano bạc lên môi trường có thể cung cấp một bối cảnh quan trọng. Rủi ro môi trường từ bản thân bạc có thể được giảm thiểu nhờ xu hướng tạo thành các phức chất mạnh của ion bạc, rõ ràng có sinh khả dụng và độc tính rất thấp [ 42 ]. Về ảnh hưởng đến giống, có thể thấy giống thỏ địa phương (Jabali) biểu hiện lượng dư lượng thấp hơn trong cả thịt và huyết tương so với giống thỏ New Zealand. Ngoài ra, một tương tác đáng kể giữa nồng độ AgNP và giống đã được phát hiện trong lượng dư lượng bạc trong thịt. Tuy nhiên, cần có thêm các nghiên cứu để đánh giá các kiểu gen khác nhau của thỏ được điều trị bằng AgNP với các phương pháp dùng khác nhau.
Tóm lại, việc tiêm AgNP cho thỏ không có tác động đáng kể đến tăng trọng trung bình hàng ngày và hệ số chuyển đổi thức ăn so với nhóm đối chứng mà không ảnh hưởng đến chất lượng thân thịt, các thông số sinh hóa máu và đặc tính chống oxy hóa. Về mối quan tâm sức khỏe của người tiêu dùng, điều đáng lưu ý là lượng bạc tích lũy trong huyết tương và thịt tăng đáng kể khi tăng liều. Giống thỏ Jabali cho thấy hiệu quả cao hơn trong việc loại bỏ dư lượng bạc khỏi máu và thịt.
Nguồn tham khảo: